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如何優化厭氧培養箱的使用效果

更新時間:2024-11-13      點擊次數:708
   厭氧培養箱是生物學實驗室中的重要設備,用于在無氧或低氧環境下進行微生物培養、細胞培養等研究。為了提高其使用效率和培養效果,我們需要關注多個方面。
 
  一、準備工作
 
  1.環境要求:將厭氧培養箱放置在干燥、通風良好、無振動的地方,確保氣源和電源連接正常。避免周圍存在易燃易爆物品,以防發生意外。
 
  2.清潔與消毒:定期使用適當的消毒劑清潔培養箱內外表面,特別是操作臺、門把手等高頻接觸區域。可以使用0.1%苯扎溴銨溶液或2%甲醛液擦拭工作臺面及可能污染的死角,濕拖地面,保持培養箱的清潔衛生。
 
  3.檢查設備狀態:在每次使用前,仔細檢查儀器的各個部件是否處于良好的工作狀態,包括溫度控制器、傳感器、厭氧氣體入口、排氣閥和觀察窗等。確保設備各項設施完備,能夠正常運行。
 

 

  二、操作過程
 
  1.形成厭氧環境:
 
  -根據使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內放入無毒塑料袋。
 
  -開啟電源,打開溫度控制器,調節至所需的培養溫度。
 
  -向操作室內放入鈀粒(封閉)和干燥劑,同時放入美蘭指示劑(封閉),以監測厭氧環境的形成。
 
  -關緊取樣室內外門,進行真空檢查,確保密封性良好。
 
  -進行至少三次的氣體置換,第一次和第二次通常使用氮氣,第三次使用混合氣體(如N2:H2:CO2=85%:10%:5%),以排除操作室內的空氣。
 
  2.催化脫氧:打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧。一小時后打開美蘭指示劑觀察其變色情況,以確認操作室內是否達到厭氧環境。
 
  3.滅菌處理:開啟紫外線滅菌燈,對室內進行滅菌處理。滅菌時間根據實際情況自定,但應確保充分滅菌,以減少微生物污染的風險。
 
  4.菌種置入和培養:
 
  -檢查并關閉取樣室的門,確保密封性。
 
  -將菌種放入取樣室后,打開取樣室外門并關閉外門。取樣室充滿氮氣并更換三次,以確保厭氧條件。
 
  -接種棒滅菌器的應用:使用鎳鉻電熱絲使電極短路以致變紅進行滅菌。
 
  三、注意事項
 
  1.操作規范:建立和遵循標準操作規程(SOP),確保每次實驗前凈化系統至少運轉1小時以上,同時開啟凈化臺和紫外燈。嚴格按照操作流程進行實驗,避免因操作失誤導致實驗失敗或污染。
 
  2.無菌操作:操作人員在進入操作區域前,應穿戴無菌工作服、口罩和手套,確保個人衛生。在操作過程中,應避免大幅度或快速動作,以免攪動空氣中的塵埃微粒。所有進入培養箱的物品必須經過嚴格的表面消毒處理。
 
  3.氣體管理:確保儀器內的氣體供應穩定,及時更換氣體瓶和厭氧指示劑等。在操作過程中,避免在開啟門的情況下進行操作,以免破壞厭氧環境。定期檢查氧氣、氫氣和二氧化碳氣體濃度,避免漏氣。
 
  4.設備維護:定期檢查儀器的各個部件,包括溫度控制器、傳感器、厭氧氣體入口、排氣閥和觀察窗等,確保它們處于良好的工作狀態。及時維修和更換損壞的部件,以保證設備的正常運行。
 
  5.環境監測:定期監測操作室內的微生物污染情況,包括沉降菌落計數和浮游菌測定,以確保環境符合無菌標準。使用適當的培養基進行環境微生物監測,如胰酪大豆胨瓊脂培養基(TSA),并在必要時加入中和劑,以避免假陰性結果。
 
  通過遵循以上步驟和注意事項,可以最大限度地提高厭氧培養箱的使用效率和培養效果,為生物學研究提供可靠的實驗數據。
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